通过western blotting检测到化合物与Rapamycin联用可以抑制Histone H3(Ser10)的磷酸化水平,初步探明了化合物与Rapamycin联用的机制。在动物水平上,使用了人类QGY裸鼠移植瘤模型检测了化合物与Rapamycin的联用能力,与Sorafenib+Rapamycin阳性对照组相比,化合物与Rapamycin表现点击此处出与之相当的联用效果以及较低的毒性。 我们还初步检测到化合物与Sunitinib联用可以抑制包括肝癌、宫颈癌、结肠癌等多种肿瘤细胞系的生长,利用流式细胞仪发现化合物与Sunitinib联用可以引起细胞凋亡。此联合应用在体内的效果及其机制正在进一步研究中。 此外,我们还对筛选到的阳性化合物S7及S39做了进一步药效药理的研究没有。 使用基于Kinase-Glo发光激酶检测法的Aurora B高通量筛选模型检测了阳性化合物对体外Aurora B激酶活性的抑制能力,发现阳性化合物的抑制能力与VX680相当。利用分子对接的方法模拟了阳性化合物与Aurora B的结合作用。 进一步验证了化合物在细胞水平上对肿瘤细胞系的生长抑制的IC50值,两个化合物分别Alisertib临床试验对不同组织来源的细胞系包括肝癌、黑色毒瘤、结肠癌、宫颈癌等显示出不同程度的生长抑制；通过对多种细胞株的时间梯度和药物浓度梯度生长曲线进行检测,测定出化合物对细胞生长抑制的的时间曲线；通过克隆形成率实验证明化合物处理的肿瘤细胞单克隆的形成能力大大下降；通过RNAi的方法发现化合物对内源性Aurora B消减后细胞生长的抑制作用下降。 利用流式细胞仪检测到化合物处理的细胞出现显著的G2/M期阻断和细胞凋亡。