将miR-19b抑制剂或阴性对照寡核苷酸转染到OVCAR-3细胞中,Transwell实验检测miR-19b的表达对卵巢癌细胞侵袭

将miR-19b抑制剂或阴性对照寡核苷酸转染到OVCAR-3细胞中,Transwell实验检测miR-19b的表达对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响。免疫印迹分析(Western blot)技术检测miR-19b对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的表SB525334细胞系达及对PTEN/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响。双报告基因实验用于检测miR-19b与PTEN的3′-UTR区之间的相互作用。结果 与正常卵巢组织比较,卵巢癌组织及卵巢癌细胞系SKOV-3和OVCAR-3中miR-19b高表达,其相对表达水平分别为3.56±0.68、3.01±0.02、3.78±0.04(P均<0.05)。Transwell实验表VX-661购买明,抑制miR-19b的表达可降低OVCAR-3细胞的侵袭和迁移能力。上调miR-19b的表达可抑制OVCAR-3细胞中PTEN蛋白的表达水平,并使磷酸化的AKT蛋白的表达水平显著升高。双报告基因检测结果显示,与对照组相比,miR-19b可与PTEN的3′-UTR区结合使其重组载体的荧光素酶活性下降。结论 miR-19b在卵巢癌细胞中存在异常高表达,可促Emricasan化学结构进卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力,有望作为卵巢癌患者潜在的生物标志物和治疗靶点。
卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居妇科恶性肿瘤之首。患者就诊时通常已处于晚期,治疗效果差且易产生耐药性。故阐明卵巢癌发病的分子机制对于促进早期诊断和发现新的治疗方法至关重要。外泌体是一种携带多种物质的细胞外囊泡,包裹在外泌体中的miRNA广泛参与卵巢癌肿瘤微环境的形成、肿瘤的发生发展以及耐药性的产生,并在卵巢癌的诊治中具有较大的应用价值。

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