方法采用同源克隆法和5’RACE(rapid amplification of c DNA ends)技术克隆UGTCs4基因的全长c DNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过半定量RT-PCR(semi-quantitativer购买PanobinostateversetranscriptionandpolymeraseChainreaction)方法检测不同诱导物条件下的基因表达情况。结果 UGTCs4基因的c DNA全长为1 380 bp,编码459个氨基酸。分子进化树分析,该糖基转移酶基因与已知selleck HPLC控制的藏红花酸糖基转移酶基因UGTCs2具有相同的糖基化藏红花酸的功能。RT-PCR的结果显示,UGTCs4基因能够响应吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、过氧化氢(H2O2)、茉莉酸甲酯(Me JA)多种处理,这些处理均能促使其进行时间转录。结论首次从藏红花悬浮细胞中分离并报道了UGTCs4的c DNA克隆,并证实UGTCs4对不同诱导子的响应情况,为进一步研究藏红花素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。
为了探究PRL基因多态性与鸡产蛋性能的相关性,试验以95只百宜黑鸡为研究对象,利用PCR扩增技术结合直接测序方法对鸡PRL基因SNP位点进行筛选。