231），但在N分期中Fli-1的表达有差异（p=0.03）。在小细胞肺癌中，不同性别之间的Fli-1表达水平无差异，同样不同年龄分层之间Fli-1的表达水平无差异。 结论：本研究发现Fli-1在小细胞肺癌组织中的表达水平和表达强度显著高于癌旁组织和非小细胞肺癌组织，Fli-1可成为诊断小细胞肺癌的一种分子学标志物；同时Fli-1在广泛期小细胞肺癌中的表达阳性率和表达强度高于局限期，在IV期中表达强度高于I-III期，它可成为判断小细胞肺癌分期的相关指标。Fli-1的表达水平与淋巴结转移有关，N分期高的小细胞肺癌其Fli-1的表达水平增强，可推测Fli-1在小细胞肺癌侵袭转移中起一定作用。本研究结果推测Fli-1基因在恶性肿瘤进展过程中扮演着重要角色，它可能成为小细胞肺癌的潜在治疗靶点，本研究可为小细胞肺癌的分子发病机制及新型靶向药物研发提供临床数据。
目的:使用荧光共振能量转移试验（FRET-VWF73）的方法，对造血干细胞移植（HSCT）患者移植预处理前及预处理后的ADAMTS13活性及其抑制物进行检测。探讨ADAM-TS13活性减低的原因，评估ADAMTS13的活性及抑制物在移植过程中的意义。
方法:(1)移植病例：取自2010年09月至2011年09月间我院行HSCT的血液系统疾病患者共113例（男66例，女47例），中位年龄32（18～57）岁。按疾病诊断分：急性髓细胞性白血病（AML）39例，急性淋巴细胞性白血病（ALL）24例，慢性髓细胞性白血病（CML）16例，急性杂合细胞性白血病（AHL）4例，淋巴瘤13例，其他17例。按移植类型分：自体移植16例、异基因移植97例（同胞全相合异基因移植48例、无关供体全相合异基因移植30例、单倍体异基因移植10例，脐血干细胞移植9例）。预处理根据移植类型分别采取改良BUCY，TBI+CY，BEAM等方案。 或者 (2)使用FRETS-VWF73荧光底物检测的方法检测113例移植病人预处理前后ADAMTS13的活性。 (3)检测其中83例病人ADAMTS13抑制物的含量：将待测血浆56℃环境中灭活1h，然后取灭活后的血浆与正常人混合血浆混匀后于25℃条件下孵育2h。利用FRETS-VWF73荧光底物检测的方法对孵育后血浆的ADAMTS13活性进行检测。 (4)统计分析：数据采用均数±标准差表示，组间均数比较采用方差分析，两样本平均值的比较采用t检验，率的比较采用卡方（X2）检验，以P
目的：探讨蓝萼甲素（Glaucocalyxin
A,GLA）对人肺癌A549细胞的抑制作用及其作用机制，为GLA的抗肿瘤作用及用于临床提供进一步的实验依据。 方法：以不同浓度的GLA干预体外培养人肺癌A549细胞,用MTT法观察其对A549细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化; Hoechst33258染色观察给药后A549细胞核形态的变化，透射电镜（TEM）观察A549细胞超微结构的改变,扫描电镜(SEM)观察A549细胞表面结构改变;western blot法检测GLA对caspase-3、8和PARP蛋白表达的改变。RT-PCR方法检测GLA对A549细胞内caspase-3、8和PARP基因表达的影响。实时定量(Real 获悉更多 time)PCR检测A549细胞内microRNA30a的表达情况。 结果：GLA对体外培养A549细胞具有增殖抑制作用（P＜0.05，P＜0.01），并呈剂量和时间依赖趋势；Hoechst33258染色后，荧光显微镜下可见A549细胞胞核致密浓染;TEM观察可见A549细胞核皱缩、染色质边集等细胞凋亡的特征性改变；SEM观察可见A549细胞微绒毛减少，部分细胞膜表面出现一些大小不一的凹陷或孔洞。流式细胞仪PI单染结果显示不同浓度GLA作用A549细胞48h后，S期细胞比例增加（P＜0.05）；AnnexinⅤ-FITC双染结果显示不同浓度GLA作用于A549细胞48h后,细胞凋亡率逐渐增加（P＜0.01），3-甲基腺嘌呤(3-MA)与GLA联合应用可使细胞凋亡率增加（P＜0.05）；GLA干预A549细胞后Western BMN 673体内 blot检测结果:caspase3、caspase8、PARP蛋白表达上调，且均呈剂量依赖趋势；RT-PCR结果：caspase-3mRNA、caspase-8mRNA、PARPmRNA的表达上调（P＜0.05），Real time PCR结果表明，microRNA30a表达下调（P＜0.05）。 结论：蓝萼甲素(GLA)对体外培养人肺癌A549细胞的增殖具有一定的抑制作用,并可诱导细胞凋亡和自噬，且可使A549细胞阻滞在S期，其诱导细胞凋亡的机制可能与激活caspase-8信号通路和下调microRNA30a有关。
研究背景 依他尼酸(EA)是一种谷胱甘肽转移酶(GSTπ)抑制剂,具有较弱的抗肿瘤活性。但由于EA生物利用度低,副作用大,限制了其在临床的进一步应用。根据生物等电子重排原理,我们设计并合成了一系列EA嗯二唑衍生物,通过筛选,发现化合物5-[2,3-二氯-4-(2-亚甲基-1-代丁基)氯苯]-3-甲基-1,2,4-噁二唑(6r)具有较高的抗肿瘤活性,具有进一步研究成为抗肿瘤药物的价值。
实验方法 体外实验：MTT法评价化合物6r对一系列肿瘤细胞增殖的抑制作用,并选取敏感细胞株人结肠癌SW620细胞及人前列腺癌PC3细胞进一步研究。Hoechst33258染色法,FITC-AnnexinV/PI双染法检测6r对肿瘤细胞凋亡的影响；碘化丙啶(PI)单染法检测6r对肿瘤细胞周期的影响。Western blotting法检测6r对肿瘤细胞中GST71, EGFR, PI3K/Akt信号通路分子及周期蛋白Cyclin D1表达水平的影响。 体内实验：分别构建裸鼠皮下接种结肠癌SW620细胞移植瘤,皮下接种前列腺癌PC3细胞移植瘤以及原位接种标靶荧光素酶基因前列腺癌PC-3M-Luc-C6细胞移植瘤模型,以6r治疗组,5-氟尿嘧啶(5-Fu)或米托蒽醌(Mitoxantrone, MA)阳性对照组及溶剂阴性对照组进行裸鼠实验。采用尾静脉方式给药,隔天给药并连续给药数周。实验结束后,处死裸鼠,取出肿瘤并称重,通过与阴性对照组比较评价6r体内抗肿瘤活性。Western blotting法检测6r对肿瘤组织中GSTπ,凋亡相关蛋白Caspase-3, bcl-2/Bax, Cyt-C及EGFR/PI3K/Akt表达的影响 实验结果 体外实验结果：体外生长抑制试验结果表明,6r对大多数肿瘤细胞具有较强的抑制作用,对SW620及PC3肿瘤细胞半抑制率IC50分别为4.89μM和3.79μM,选取敏感肿瘤细胞株PC3及SW620进一步实验。Hoechst33258染色结果显示,2μM,4μM6r可明显诱导肿瘤细胞凋亡。荧光显微镜观察,SW620及PC3细胞核染色质浓染,固缩或聚核膜周边,或呈块状碎裂改变。FITC-AnnexinV/PI双染法试验结果表明,4μM6r处理SW620及PC3肿瘤细胞24h凋亡率分别为28.8%和29.