抗LDL及抗oxLDL IgM亚类单抗的制备为研究天然抗体在体内脂质代谢和相关心脑血管疾病如动脉粥样硬化等发生发展中的作用提供了重要的研究工具。 2.天然属性抗oxLDL IgM亚类抗体3A6降低了泡沫细胞的形成,可能对动脉粥样硬化形成有预防作用。 Galunisertib半抑制浓度 3.天然属性抗oxLDL IgM亚类抗体3A6对apoE基因敲除小鼠血脂及血浆oxLDL含量无明显影响;但对apoE基因敲除小鼠胸主动脉粥样硬化斑块形成有抑制作用。 4. 3A6不能抑制脂多糖活化的巨噬细胞对oxLDL的摄取,并且通过其Fc段与巨噬细胞的结合而促进了oxLDL介导的泡沫细胞的生成。脂多糖通过TLR-4受体活化了p38MAPK和NF-κB通路,并且上调了Fcα/μ受体在巨噬细胞表面的表达。 5.我们的研究结果证实了LPS浓度升高加重动脉粥样硬化形成的内在机制。
第一部分大鼠同种异体原位肺移植模型的建立 目的:通过大鼠套管法吻合技术建立大鼠左侧原位肺移植模型。方法:将60只SPF级SD大鼠随机分为供、受体两组,采用三套管吻合技术完成大鼠肺移植模型。结果:30例手术中,供肺灌注到摘取时间(10±1)分钟,供肺完成套管时间(10±4)分钟,供体动静脉、支气管吻合时间(15±2)分钟,移植肺热缺血时间(16±2)分钟,冷缺血时间(30±5)分钟,手术平均时间(80±10)分钟,术后15天生存率达86%,其中两例死于急性肺水肿,一例死于肺静脉栓塞,一例死于对侧气胸。结论:三套管大鼠同种异体肺移植模有效、可靠,为临床肺移植提供了较好的实验基础,但是模型操作复杂,需要长时间的学习和反复操作来提高肺移植模型的稳定性。
第二部分落新妇甙对大鼠肺移植排斥反应的抑制作用 目的:运用排斥反应分级及观察落新妇甙对大鼠移植肺中支气管肺泡灌洗液诱导肺成纤维细胞胶原增生的抑制作用实验,探讨落新妇甙对大鼠肺移植排斥反应的抑制作用。方法:采用大鼠左侧原位肺移植模型。随机将肺移植后的60只大鼠分为4组:A组肺移植后用生理盐水(1ml/天)灌胃,B组肺移植后用环孢素A (5mg/kg/天)灌胃,C组肺移植后用落新妇甙(1mg/kg/天)灌胃,D组肺移植后用环孢素A (2.5mg/kg/天)及落新妇甙(1mg/kg/天)灌胃。术后第30天(每组抽取5只大鼠)切取移植肺观察肺急性排斥反应分级情况;另外每组10只大鼠,取受体支气管肺泡灌洗液。用收集的支气管肺泡灌洗液在体外刺激人胚胎成纤维细胞,通过MTT比色法和酶联免疫(ELISA)法分别检测人胚肺成纤维细胞的增殖及Ⅰ型胶原的合成,并对检测结果进行分析。结果:(1)B组、C组及D组移植肺排斥反应分级均低于A组(P<0.01);D组移植肺急性排斥反应最轻,优于C组(P<0.05)和B组(P<0.01)。(2)受者移植肺中支气管肺泡灌洗液显著促进了人胚肺成纤维细胞的增殖和胶原合成;(3)B、C、D组的支气管肺泡灌洗液诱导的人胚肺成纤维细胞Ⅰ型胶原合成有显著的抑制作用(P0.05)。D组(落新妇甙加PI3K/Akt抑制剂LY294002组)T细胞凋亡和PIK3/Akt表达明显高于对照组,p38MAPK明显低于对照组。结论:落新妇甙诱导大鼠肺移植排斥反应中活化T细胞凋亡与其激活p38MAPK信号传导通路、及抑制PI3K/Akt信号传导通路有关。
前言:胃癌是一种常见的恶性肿瘤,据有关文献报道,在我国其死亡率居各种恶性肿瘤之首。胃癌患者的主要死因为肿瘤病灶的侵袭及转移。因此探讨其侵袭转移机制显得尤为重要。
Lonafarnib数据表 在众多的促转移分子中,转化生长因子β(transforming
哪里 growthfactor beta,TGFβ)是一重要分子,它参与了多种肿瘤的侵袭和转移过程。用基因转染的方法诱导肿瘤细胞中TGF-β1表达可增加肿瘤细胞的转移能力。同时有研究表明,阻止TGF-β信号通路可以抑制胃癌的转移。我们的早期研究发现TGF-β1可以促进胃癌细胞SGC7901和BGC823的浸润和转移。一些临床研究也显示:TGF-β1的表达与淋巴结的转移和预后不良呈正相关。目前虽然已有许多研究证实了TGF-β1在肿瘤侵袭和转移中的作用,但其具体机制尚不明确。 研究表明TGF-β促浸润转移作用可由smad依赖通路及smad非依赖通路介导。TGF-β与细胞膜Ⅱ型受体(TβRⅡ)结合后,激活Ⅰ型受体,活化的Ⅰ型受体激活下游分子smad2和smad3,随后smad2/smad3与smad4结合形成smad复合物并转移到核内,调节TGF-β介导的靶基因转录。而在smad非依赖通路中,JNK,Erk和P38通路则被认为是关键性的通路。基于TGF-β在肿瘤发生与转移中的重要性,所以深入探讨TGF-β促转移机制具有非常重要的理论及临床意义。 人类fascin 1基因属于fascin家族,其蛋白质编码产物是一种分子量为55 kDa的细胞骨架蛋白,可与F肌动蛋白结合,定位于细胞质张力纤维和细胞膜皱褶(ruffles)边缘与细胞的运动、癌细胞的转移有密切关系的公状伪足、微棘(microspikes)的核心肌动蛋白束中。细胞内fascin 1基因表达上调引起细胞间连接发生解离,同时细胞的运动也相应增加。而将fascin 1基因转染至fascin 1基因低表达的结直肠癌细胞系SW 1222中,结果细胞膜表面突起增多,细胞分化程度降低,细胞运动性增强。Fascin蛋白在胃癌中表达明显增高,它的高表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和复发密切相关。有研究表明在肺癌中TGF-β1可诱导fascin1基因表达上调,且TGF-β1和fascin1蛋白都与肺癌的侵袭与转移有关,但是目前TGF-β与fascin1在胃癌侵袭与转移中是否存在调控关系尚未见文献报道。 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发展起来的一种新技术,由于它能特异而有效地阻断靶基因的表达,目前被广泛应用于各种肿瘤的研究。我们构建了针对Fascin1的短发夹RNA(shortharpin RNA,shRNA)真核表达载体并首次转染人胃癌细胞MKN45,观察抑制fascin1表达前后,TGF-β1作用对胃癌侵袭和转移的影响,并对其机制作初步探讨。 目的:研究TGF-β1对fascin1基因表达的影响,以及fascin1在TGF-β促胃癌侵袭与转移中的作用。探讨以fascin1为靶的胃癌基因治疗以及进一步揭示TGF-β1促胃癌侵袭和转移机制提供理论和实验依据。 方法: 1.