材料和方法采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA和蛋白酶体抑制剂MG-132作用淋巴瘤细胞系EL4、WEHI-231和多发性骨髓瘤细胞系

材料和方法采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA和蛋白酶体抑制剂MG-132作用淋巴瘤细胞系EL4、WEHI-231和多发性骨髓瘤细胞系J558、SP2/0、P3NSI。分别应用台盼兰法和AnnexinV/PI双、单染流式细胞仪观察两种药物以不同浓度单独和联合作用后细胞增殖、周期和凋亡的变化。Bliss法计算TSA/MG-132对各细胞株的IC50值,基于Isobolographic m许多ethod法的Calcuysn软件计算协同作用指数CI(Combination indices,CI),评价药物协同作用。Westernblot检测不同浓度药物单独和联合作用后细胞内周期和凋亡相关蛋白表达的变化,包括细胞内周期相关蛋白CyclinD1、p21和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase3。同时,观察了IRF4和c-Myc蛋白表达水平在药Selleck物作用的淋巴瘤和骨髓瘤细胞中的差异。 结果TSA和MG-132均可在24小时后呈药物浓度依赖的细胞增殖抑制。对于TSA,各细胞株IC50为3.5-8.0nM,MG-132为2.2-4.4uM。对5株细胞的协同作用指数CI值均小于1:P3NSI的CI值为0.004-0.293,J558的CI值为0.068-0.423,SP2/0D的CI值为0.029-0.3drug discovery19,WEHI的CI值为0.056-0.741,EL4的CI值为0.109-0.346。TSA/MG-132单独作用各细胞株时,细胞凋亡呈药物浓度依赖性增高;联合药物作用于细胞株,细胞凋亡率增长,协同诱导细胞凋亡作用明显。细胞凋亡相关蛋白caspase-3激活,Bax、Bcl-2表达均减少。各细胞均阻滞于G0-G1期。药物作用24后,G0/G1期细胞平均约增长一倍:41%增加到75%。统计分析显示,药物伍用对细胞周期阻滞没有协同作用。

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

*

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>