(6)构建启动子荧光素酶报告基因载体,分组为PGL4+P65组、WT+P65组、MUTAB+ P65 组、MUTAC+ P65 组、MUTBC+ P65 组、MUTABC+ P65 组,检测荧光素酶活性变化;根据A、B、C 3个位点设计特异性探针,CHIP实验验证NF-κB P65与启动子区位点直接结合。4.miR-577靶基因的筛选和ABT-737半抑制浓度鉴定(1)通过靶基因数据库miRDB、PITA、RNA22和Targetscan分析miR-577潜在调控的靶基因,TCGA分析靶基因在胃癌中的表达水平及其相应的表达丰度;荧光定量RT-PCR分析过表达miR-577后靶基因的变化;构建靶基因3′UTR区域双荧光素酶载体,验证miR-577与靶基因3′UTR区直时间接结合。(2)荧光定量RT-PCR分析选定的靶基因SDPR在30例胃癌新鲜临床组织标本及其癌旁配对正常胃粘膜组织中的表达,并分析SDPR与miR-577表达在新鲜组织水平的相关性。(3)对153例有完整随访资料的石蜡包埋胃癌组织进行SDPR免疫组化染色,分析SDPR与临床病理参数和患者预后的关系。(4)设计特异Z-DEVD-FMK订单性siRNA干扰SDPR,构建SDPR过表达载体,倒置显微镜观察形态学变化,Transwell实验检测胃癌细胞迁移能力的变化,Western Blot检测EMT标志物的改变;(5)免疫荧光共染SDPR和ERK，CO-IP验证SDPR与ERK相互作用,Western Blot检测ERK/NF-κB通路指标的改变。(6)过表达和干扰SDPR,荧光定量RT-PCR检测miR-577的表达变化。