目前存在的问题是,仍有40%的获得性耐药机制尚不明确。其中可能包括EGFR外的酪氨酸激酶受体信号传导通路的激活、EGFR下游信号通路中的分子异常活化、蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)的缺失、EML4-ALK融合基因及细胞发生EMT等。 上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transitions, EMT)是指在多种因素刺激下,细胞由上皮表型向间BGB324分子重量质表型转化的一种现象,以E-钙黏蛋白(E-cadherin)、连环蛋白(catenin)等上皮型标志蛋白的减少或缺失以及波形蛋白(vimentin)、纤维粘连蛋白(fibronectin)等间质型标志蛋白表达增多为主要特征。EMT是一种基本的生理病理现象,不仅在多细胞生物胚胎发育与器官形成中、慢性炎症及多种慢性疾病的发生发展过程中起着重要作用SKI-606核磁共振,而且存在于肿瘤的发展过程中,与肿瘤的发生、肿瘤细胞的原位侵袭和远处转移均密切相关[12-15]。胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factor I receptor, IGF-1R)是存在于细胞膜表面的跨膜四倍体,具有酪氨酸激酶活性。IGF-1和IGF-2与受体IGF-1R结合后可激活受体细胞内酪氨酸激酶,使可能多种蛋白的酪氨酸残基磷酸化,进而激活两条主要的信号通路：PI3K-AKT通路和ERK/MAPK通路,促进有丝分裂及细胞生长。另外,IGF-1R在肿瘤组织中具有高表达,其表达异常与恶性肿瘤的发生密切相关。 新近研究显示,EGFR野生型NSCLC细胞对EGFR-TKIs耐药过程中伴随着EMT及IGF-1R蛋白增加,提示EMT和IGF-1R可能与NSCLC对EGFR-TKIs的获得性耐药有关,但两者诱导耐药的细胞学机制尚未阐明。

研究背景与目的 1985年Stein等首次描述间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL),并确认为一种新的淋巴瘤类型。ALCL是一种T细胞淋巴瘤,以CD30(肿瘤坏死因子受体超家族成员8,TNFRSF8)表达为特征,在成人非霍奇金淋巴瘤中比例小于5%,但在儿童中发病率较高,占儿童非霍奇金淋巴瘤的40%。原发系统型ALCL病而且理特征主要由淋巴样细胞组成,细胞较大,胞质丰富,胞核经常成马蹄样或胚胎样。原发系统型ALCL包括两个亚型:ALK(+)型和ALK(-)型。 ALK(间变性淋巴瘤激酶,anaplastic lymphoma kinase)完整蛋白质分子是一个200kDa的受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase,RTK),由2p23染色体区段编Selleck Afatinib码,拥有胞外区,穿膜区和胞内区。全长ALK与白细胞酪氨酸激酶高度同源,都属于胰岛素受体超家族。虽然ALK首先在造血系统肿瘤中被发现,但是ALK基因从未检测到在正常造血组织有表达。ALK在正常组织的功能迄今为止仍不清楚。在ALCL中出现的是由染色体易位t(2;5)(p23;q35)编码的NPM-ALK融合蛋白,2p23上的ALK基因易位至5q35的NP也许M(核磷酸蛋白)基因旁并被后者激活而高表达,ALK激酶呈激活状态可能是ALCL成瘤的关键机制,也是部分ALCL特征性的遗传学指标。融合蛋白长度80kDa,相应位置为全长ALK的胞内区部分,其N末端与NPM(phosphoprotein nucleophosmin)结合,NPM执行二聚体功能,结构性激活ALK的激酶活性和其致瘤性。NPM-ALK是一个“停靠蛋白质”,可以依次偶联有丝分裂、抗凋亡、粘附及DNA修复能力等多条信号传导途径。

并尝试分析HIF-1α基因对慢性髓细胞白血病细胞增殖作用的影响和可能的作用机制。方法通过实时定量RT-PCR方法检测慢性髓细胞白血病病人和相对正常病人骨髓标本中HIF-1α的m RNA表达水平差异。通过RT-PCR法确认K562细胞系中HIF-1α被Si RNA沉默。通过CCK-8法测定沉默HIF-1α后的K562细胞获悉更多系的增殖和集落形成能力。通过RT-PCR法检测沉默HIF-1α后的K562细胞系中p21、p53的m RNA水平,通过westernblot法检测沉默HIF-1α后的K562细胞系中p21、p53蛋白的表达水平。结果1慢性髓细胞白血病病人骨髓中HIF-1αm RNA的表达水平显著高于对照组,存MS-275供应商在显著的统计学意义(P<0.05)。2沉默K562细胞中的HIF-1α能显著抑制K562细胞系的增殖能力,存在显著的统计学意义(P<0.05)。3沉默K562细胞中的HIF-1α能显著抑制K562细胞系的集落形成能力,存在显著的统计学意义(P<0.01)。同时反义核苷酸转染入K562细胞后,随http://www.selleckchem.cn/products/gsk1120212-jtp-74057.html着培养时间的延长,细胞增殖速度与对照组相比明显减慢,差异具有统计学意义(P<0.05),而转染正义核苷酸组,细胞生长速度与对照组比,无显著性差异。提示了低表达VEGF表达水平可以抑制K562细胞的增殖。4在转染反义核苷酸组的细胞中加入外源性的VEGF165后,能部分抵消反义核苷酸抑制K562细胞生长的作用,差异有统计学意义(PATO+17-AAG>LBH589+17-AAG。

此外,这两个异二聚体之间也是依靠微弱的作用而结合,但是,一旦这两个异二聚体结合在一起,它们又能协同作用最终形成一个分子比近乎1:1:1:1的四蛋白复合物,我们的酵母双杂交实验进一步证实了这一结论。此外,Mis12复合物也能够和Ndc80复合物中的Spc24-Spc25异二聚体以及KNL-1蛋白的C端发生直接结合,因此我们推论人中的Mis12复合物也具有同Ndc80复合物、KNL-1蛋点击此处白结合形成KMN复合物的能力。除了能形成KMN复合物之外,Mis12复合物还通过Mis13和Mis12蛋白同外层动点蛋白Zwint-1相结合,除此之外,Mis13蛋白还能特异的与CENP-H/CENP-I复合物中的CENP-H相结合,但是却不会同该复合物中的另外一个组份CENP-50相结合,说明Mis13和Mis12蛋白主要介导Mis12复合物同其他动点蛋白NSC683864之间的结合。 综上所述,我们认为Aurora-B激酶对Mis13的磷酸化作用促使Mis13在动点上聚集,从而形成一个完整的Mis12复合物。而一旦Mis12复合物形成,它又会同Ndc80复合物、KNL-1蛋白结合形成KMN复合物,组装出有效的动点-微管结合表面;此外,它们还会募集马达蛋白CENP-E等到动点上,实现染色体的运动和分离。
蛋白激酶(prote而且in kinase,PK)是细胞内最大的蛋白家族之一,在真核细胞信号转导中扮演重要的角色。蛋白激酶是一类磷酸转移酶,其作用是将ATP分子的γ磷酸基转移到底物蛋白特定的氨基酸残基上,使底物蛋白磷酸化。人类基因组内共含有518个蛋白激酶基因,约占真核生物基因的1.7%。蛋白激酶活性异常通常会引发包括癌症、糖尿病、炎症在内的许多重大疾病。超过400种人类疾病与蛋白激酶有直接或间接的关系。因此蛋白激酶已成为继G蛋白偶联受体之后的第二大药物治疗靶标。

此外,本研究对前期工作中鉴定出的NID1蛋白扩大样本量进行验证,分析NIDl在卵巢浆液性腺癌中的诊断及临床意义。 结果： (1).本研究回顾性分析了271例明确两级分级的OSC患者的临床病例资料,分为低级别组(n=38,占12.7%)和高级别组(n=233,占87.3%)。低级别组和高级组在肿瘤家族史、术前确认细节CA125水平、手术病理分期、有无淋巴结转移、术前新辅助化疗、淋巴结切除及术后治疗情况等方面,均无显著差异(P>0.05)。两组中对铂类耐药的患者所占比例比较,无显著差异(P=0.280)。低级别组年龄≤50岁的患者所占比例较高级别组高,差异有统计学意义(P=0.027)。与传统WBTK inhibitorHO分级相比,低级别组中以高中分化(57.1%)为主,而高级别组中以中低分化(98.6%)为主。全组中位随诊时间为26.9个月(2.4～79.9个月),失访率为4.1%。预后单因素分析显示两级分级系统对全组患者OS有显著影响(P=0.034),对PFS无影响(P=0.225)。多因Fulvestrant素分析显示两级分级系统并非为卵巢浆液性癌的独立预后因素。 (2).通过生物信息分析,我们从数据库中挑选了β-catenin和Grb2两个蛋白,采用ELISA技术检测了其在OSC患者及健康女性血浆中的水平。研究发现,P-catenin和Grb2蛋白在OSC患者血浆中的水平显著低于健康体检者(P0.05),仅Grb2蛋白水平在行新辅助化疗的患者中显著高于直接手术者。

研究结果： 1.IGF-1对肝细胞癌HepG2、Hep3B生长及转移作用的影响 IGF-1促进肝癌细胞的生长、增殖及侵袭；IGF-1可以增加其受体磷酸化水平，进而增加pAkt、pGSK3β的表达，上调细胞周期的关键蛋白酶cyclin D和pRb的表达，同时，通过增加β-catenin蛋白的表达，使上皮细胞结构特征蛋Selleck 3-deazaneplanocin A白E-cadherin表达降低，而间质细胞结构蛋白Vimentin的表达增加，诱导肝癌细胞EMT的发生，当去除IGF-1刺激后，E-cadherin表达重新增加，而Vimentin表达未见明显变化。 2.PPP对肝癌细胞HepG2、Hep3B生长侵袭作用的影响 PPP可以抑制IGF-1诱导BI 6727分子量的肝癌细胞的生长、侵袭，促进肝癌细胞凋亡的发生，通过抑制pAkt的活性，增加Caspase3、Caspase9、Cytochrome c及Bax/Bcl-2比值；抑制IGF-1诱导的E-cadherin降低及Vimentin升高，降低β-catenin的表达。 研究结论： IGF-1作用于selleck化学药品肝癌细胞HepG2、Hep3B，通过激活IGF-1R/PI3K/Akt/GSK3β通路影响细胞周期关键蛋白cyclin D和Rb的表达，促进肝癌细胞的生长增殖，同时通过激活β-catenin的表达，诱导细胞骨架蛋白E-cadherin表达下降、Vimentin表达增加，进一步诱导肝癌细胞迁移、侵袭能力的增加，且当IGF-1浓度降低时，肝癌细胞EMT发生呈可逆性变化。

通过基因通路分析软件IPA以及差异表达基因功能富集分析,进一步确定SAHA是通过调控DNA损伤修复、细胞周期以及线粒体细胞凋亡等多个信号转导通路诱导细胞的凋亡。最后,本文预测分析了SAHA作用的主要靶标(或通路)以及这些靶标(或通路)间的相互作用关系。
目的：通过结构修饰合成大黄酸氨基酸钠盐衍生物,考察其抑制肿Ruxolitinib 花费瘤和放射增敏活性,为寻找高效低毒的肿瘤放射治疗药物提供研究基础。 方法：以大黄酸为先导化合物,将其3位羧基分别与亮氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、色氨酸、蛋氨酸、脯氨酸和2-氨基丁酸的氨基形成酰胺键,合成8个衍生物,再碱化得钠盐。采用MTT法测定这些化合物对H460肺癌细胞的生长抑制活Lonafarnib制造商性。选取活性较好的化合物,在相应的IC15和IC20浓度下,初步测定放射增敏活性。 结果：大黄酰亮氨酸钠、大黄酰异亮氨酸钠、大黄酰天冬氨酸二钠、大黄酰谷氨酸二钠、大黄酰蛋氨酸钠对肺癌H460细胞具有一定的浓度和时间依赖型生长抑制活性。其中大黄酰亮氨酸钠作用24h、48h、72h的IC50很少值分别为279.863μM、92.735μM、65.56μM大黄酰异亮氨酸钠作用24h、48h、72h的IC50值分别为205.251μM、164.222μM、77.442μM,明显低于大黄酸钠相应时间点的IC50。初步放射增敏实验表明,大黄酰异亮氨酸钠分别在相应的IC15和IC20浓度下与γ射线联用,对肿瘤细胞的抑制率大于单纯照射组,表明其有一定的放射增敏作用。

以2-甲基-5-硝基苯胺和3-乙酰基吡啶作为起始原料，经硝化、加成、环合、还原得到伊马替尼活性母体结构N-(2-甲基-5-氨基苯基)-4-(3-吡啶基)嘧啶-2-胺。将此化合物作为母体结构，对其进行结构修饰和改造，设计合成了苯氧乙酰胺类、脲类、芳酰基硫脲类共计19个伊马替尼衍生物，并通过IR、MS、1H-NMR等确证了分子结构。 这些化合物通过MTT法细胞活性初步测试，结果表明确认细节都具有一定的抗肿瘤活性，其中化合物F-7和G-5的活性较好，具有潜在的进一步研究价值。
研究背景： 慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia, CML)是一种造血干细胞克隆增生性疾病,具有肿瘤恶性克隆标志—Ph染色体,所形成的BCR-ABL融合基因具有异常激活的酪氨酸激酶活性,是导致慢性髓性白血病发生的根本原因。酪氨酸Epigenetics抑制剂激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI)的出现具有里程碑式的意义,全面改善了CML的治疗效果,显著延长了CML患者的总生存(overall survival, OS)、无事件生存(event free survival, EFS)和无进展生存(progression free survival, PFS)。但随之出现的时间伊马替尼以及对其他二代、三代TKI的耐药,给CML的治疗带来了新的挑战。 根据目前研究显示,TKI耐药机制主要包括两类：BCR-ABL依赖和非BCR-ABL依赖。BCR-ABL依赖的耐药机制包括：BCR-ABL融合基因异常扩增及表达上调或ABL激酶区的点突变；BCR-ABL非依赖机制包括：TKI摄入转运蛋白hOCT-1的低表达、多耐药基因MDR-1的过表达、a1-酸性糖蛋白的结合作用、其他信号转导通路异常激活、表观遗传学改变[4]。

动物模型的建立及分组：选用健康雄性6-8周龄Wistar大鼠66只(清洁级)随机分成：对照组、模型组和乌司他丁干预组,对照组按1、3、6h分为3个亚组,模型组和干预组按0.5、1、3、6h分为4个亚组,共11组,每组6只。模型组大鼠给予LPS(5mg/kg)尾静脉注射,干预组大鼠在尾静脉注射LPS(5mg/kg)前30min给予UTI(50000单位/kg)尾静脉注射。对照组大鼠给予尾静脉注射等量的生理盐水(NS)。整个实验期间所有大鼠均喂标准饲料,实验前禁食12h,自由饮水。 2.标本采集：各组动物在相应的不同时点分别给予3%戊巴比妥钠腹腔麻醉打开并暴露胸腔,肉眼观察肺组织大体病理改变。经左心室穿刺抽血,离心后留取血清置于-80℃冰箱保存。取血结束后立即留取肺部标本,取左肺计算肺组织湿／干重比值(W/D)；取右肺上叶以10%中性甲醛固定以备HE染色和免疫组化染色。取右肺中、下叶放入液氮中冻存,-80℃保存,以备Western

blot及Real Time RT-PCR检查。 3.常规HE染色并计算肺组织病理损伤评分。 4. ELISA法检测血清中TNF-α和IL-10的浓度。 5. Real Time RT-PCR法检测肺组织中TNF-αmRNA的相对表达量。 6.免疫组化法检测磷酸化的p38 MAPK蛋白在肺组织中的表达。 7. Western blot法检测肺组织中磷酸化的p38 MAPK的表达。 8.统计学分析：采用SPSS 13.0统计软件包分析。计量资料用means±SD表示,各组之间的差异采用单因素方差分析(one-way

Selleck OSI 744 ANOVA),其后两两之间比较采用LSD检验,p100次／分),口唇发绀,精神萎靡,少动少食,抓取时无力逃避,3h组和6h组各有1只大鼠死亡,濒死前出现抽搐,大小便失禁,深大呼吸,四肢僵硬,解剖后肉眼见肺组织体积增大,脏层胸膜张力较高,表面色泽暗红,可见包膜下点状、片状出血,切面疏松,有黄色或淡红色液体溢出,尤以6h组最为明显；干预组各时点表现相对较轻,所有动物均存活,抓取时能够逃避,解剖后肺有类似上述改变,但范围小,程度轻,体积增大不明显,表面呈红色,可见少量出血点。 selleck合成 2.肺组织湿／干重比值(W/D)的变化：模型组大鼠肺组织的W/D在3h和6h明显高于对照组(p
研究背景 多器官功能障碍综合症(MODS)是引起严重烧伤患者死亡的主要原因之一。虽然引起MODS的病理生理过程纷繁复杂,但随着研究的深入人们逐渐达成共识,血管内皮细胞的功能紊乱是这一病理生理过程的中心环节。而在严重烧伤早期,血管内皮细胞的功能紊乱主要表现为烧伤后内皮细胞“毛细血管渗漏”及随之而来的间质水肿。 危重病患者时常伴有胰岛素抵抗和高血糖,而这种“创伤后胰岛素抵抗”的严重程度往往反映了这些危重病患者(如严重创伤、严重烧伤及脓毒症)的死亡风险。在一个外科重症监护病房的前瞻性研究中,人们发现强化胰岛素治疗来严格控制血糖水平可明显减少严重感染、器官衰竭以及死亡率。在关于其机制的探讨中,一些研究人员认为代谢调节机制是强化胰岛素治疗的唯一作用途径。然而,近年来人们逐渐发现胰岛素还具有抗炎、抗凋亡、促细胞增殖以及调节机体免疫功能的特性。也就是说胰岛素除了具有代谢调节特性外还具有非代谢作用机制。近期又有研究报道强化胰岛素治疗具有内皮细胞保护作用并认为其可能是阻止危重病患者多脏器衰竭和死亡的重要机制。但到目前为止,危重病患者强化胰岛素治疗的确切机制仍不清楚。 http://www.selleck.cn/products/BafilomycinA1.html 在本课题中,我们主要是探讨胰岛素对严重烧伤后内皮细胞功能紊乱的调节作用。首先,在体严重烧伤动物模型上,利用强化胰岛素处理观察其对急性肺损伤的作用。我们的设想是强化胰岛素处理是否可以通过对微血管内皮细胞的保护,防止微血管渗漏,从而达到减轻烧伤后肺组织水肿、出血及炎性细胞浸润的目的。在此基础上,我们进一步体外利用脐静脉血管内皮细胞,观察胰岛素干预后内皮细胞单分子通透性与细胞紧密连接以及凋亡的变化和内在联系,并就可能存在的细胞内信号传导机制进行相关研究。

方法 1.雄性SD大鼠75只,随机分成假烫组、烫伤组(30% TBSAⅢ○),烫伤+胰岛素处理组。氧化酶法测定烫伤后24小时内大鼠血糖变化。烫伤12小时后,HE染色观察肺脏病理变化,检测肺脏髓过氧化物酶(MPO)、血清超氧化物歧化酶(SOD)以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量变化。同时,电镜观察肺微血管内皮细胞变化,比色法检测各型一氧化氮合酶及血清一氧化氮(NO)水平。 2.体外培养原代人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),随机分为空白对照组、20%(V/V)人正常血清刺激组、20%(V/V)人烧伤血清刺激组、20%(V/V)人烧伤血清+胰岛素处理组及抑制剂(LY-294002)组,利用生物素标记的BSA测定内皮细胞单分子通透性变化,罗丹明-鬼笔环肽标记细胞骨架并观察,同时利用蛋白印迹法检测带状闭合蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白及磷酸化蛋白激酶B(AKT)的变化情况。 3.体外培养的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC),随机被分为空白对照组、20%(V/V)人正常血清刺激组、20%(V/V)人烧伤血清刺激组、20%(V/V)人烧伤血清+胰岛素处理组,刺激6小时后运用原位末端标记(TUNEL)法观察内皮细胞凋亡,分别采用免疫组织化学染色法和(或)蛋白印迹法检测抗凋亡蛋白bcl-2及eNOS的蛋白表达情况。 4.体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),随机被分为空白对照组、20%(V/V)正常人血清刺激组、20%(V/V)烧伤人血清刺激组、20%(V/V)烧伤人血清+胰岛素(10-7mol/L)处理组及抑制剂(LY-294002)组。ELISA法检测采集血清中IL-1β和TNF-α的水平。刺激6小时后,蛋白印迹法检测HUVEC胞浆抑制酶κB-α(IκB-α)和胞核NF-κB-p65的蛋白表达变化。 结果 1.

05),Sca-1+细胞比例显著高于对照组(P<0.05),但与SB431542组比较均显著降低(P0.05)。结论利用RA可以促进ES和i PS向MSC样细胞分化,分化方法较为简单,分化周期较短,为多能干细胞向MSC样细胞的分化提供了一定的方法基础。
包括人类在内的哺乳动物仅具有极为有限的再生能力,然而以蝾螈、非洲爪蟾等为代表的两栖类动物则能在特定时期完全修复缺损的组织器官。该文对近年来两栖类动物组织器官再生的细胞及分子机制研究作一综述,并以诱导成体爪蟾断肢再生为例,探讨诱导器官再生的研究策略。
AIM:To explore ex vivo the role of bone morphogenetic protein-4(BMP-4) and transforming growth factorbeta1(TGF-β1) in acute valvular response to fluid shear stress(FSS) abnormalities.METHODS:Porcine valve leaflets were subjected ex vivo to physiologic FSS,supra-physiologic FSS

magnitude at normal frequency and supra-physiologic FSS frequency at normal magnitude for 48 h in a double-sided cone-and-plate selleck bioreactor filled with standard culture medium. The role of BMP-4 and TGF-β1 in the valvular response was investigated by promoting or inhibiting the downstream action of those cytokines via culture medium supplementation with BMP-4 或者 or the BMP antagonist noggin,and TGF-β1 or the TGF-β1 inhibitor SB-431542,respectively.

Fresh porcine leaflets were used as controls. Each experimental group consisted of six leaflet samples. Immunostaining and immunoblotting were performed to assess endothelial activation in terms of intercellular adhesion molecule-1 and vascular cell adhesion molecule-1 expressions,paracrine signaling in terms of BMP-4 and TGF-β1 expressions and extracellular matrix(ECM) remodeling in terms of cathepsin L,cathepsin S,metalloproteinases(MMP)-2 and MMP-9 expressions. Immunostained images were quantified by normalizing the intensities of positively stained regions by the number of cells in each image while immunoblots

were quantified by densitometry. R E S U LT S :Regardless of the culture medium,physiologic FSS maintained valvular homeostasis. Tissue exposure to supra-physiologic FSS magnitude in standard SB431542购买 medium stimulated paracrine signaling(TGF-β1:467% ± 22% vs 100% ± 6% in freshcontrols,BMP-4:258% ± 22% vs 100% ± 4% in fresh controls; P < 0.05) and ECM degradation(MMP-2:941% ± 90% vs 100% ± 19% in fresh controls,MMP-9:1219% ± 190% vs 100% ± 16% in fresh controls,cathepsin L:1187% ± 175% vs 100% ± 12% in fresh controls,cathepsin S:603% ± 88% vs 100% ± 13% in fresh controls; P < 0.05),while BMP-4 supplementation also promoted fibrosa activation and TGF-β1 inhibition reduced MMP-9 expression to the native tissue level(MMP-9:308% ± 153% with TGF-β1 inhibition vs 100% ± 16% in fresh control; P > 0.05). Supra-physiologic FSS frequency had no effect on endothelial activation and paracrine signaling regardless of the culture medium but TGF-β1 silencing attenuated FSS-induced ECM degradation via MMP-9 downregulation(MMP-9:302% ± 182% vs 100% ± 42% in fresh controls; P > 0.05).CONCLUSION:Valvular tissue is sensitive to FSS abnormalities. The TGF-β1 inhibitor SB-431542 is a potential candidate molecule for attenuating the effects of FSS abnormalities on valvular remodeling.